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  • 2024

    12-16

    一、引言細胞電轉化(Electroporation)是一種物理方法,它利用短暫的高電壓脈沖在細胞膜上產生臨時性的孔洞,使得外源DNA等大分子物質能夠進入細胞內部。這種方法被廣泛應用于生物學研究和生物技術中,例如基因工程、蛋白質表達和藥物傳遞等領域。為了實現高效而安全的電轉化過程,正確使用細胞電轉化儀是非常重要的。二、細胞電轉化儀的基本原理電轉化儀通過施加短時間內的高壓脈沖到含有待轉化細胞和DNA混合物的樣品中,導致細胞膜暫時性通透化。這種狀態允許DNA或其他分子穿過細胞膜并進...

  • 2024

    11-22

    原位雜交儀是一種用于分子生物學實驗的儀器,它允許研究者在細胞或組織切片上直接檢測特定的DNA或RNA序列。1.基本原理:原位雜交技術基于核酸分子間的互補配對原則,即兩條核苷酸單鏈片段在適宜條件下通過氫鍵結合,形成雙鏈結構。2.探針類型:原位雜交儀使用帶有標記的DNA或RNA片段作為探針,這些探針可以是放射性同位素標記或非放射性物質(如熒光素生物素)標記。3.實驗步驟:原位雜交實驗包括探針變性、切片處理、雜交反應和信號檢測等步驟。其中,變性是使雙鏈DNA解旋成單鏈的過程,這是雜...

  • 2024

    11-19

    一、引言電轉化儀,也稱為電穿孔儀或電轉染儀,是一種廣泛應用于生物技術領域的實驗儀器。它主要用于將外源DNA、RNA或其他分子導入到細胞中,從而實現基因編輯、蛋白質表達等目的。本文將詳細介紹電轉化儀的原理、應用以及在使用過程中需要注意的事項。二、電轉化儀的原理它的工作原理基于電場對細胞膜的影響。當施加一個短暫的高強度電場時,細胞膜上的磷脂雙分子層會發生瞬時的紊亂,形成一個暫時性的孔洞。這些孔洞允許外源DNA、RNA或其他分子進入細胞內部。一旦電場消失,細胞膜會迅速恢復其正常結構...

  • 2024

    11-14

    當核酸分子雜交箱出現故障時,應進行初步檢查和確認,然后針對具體故障進行分析和排查。如果無法解決問題,建議聯系供應商或制造商的技術支持部門進行專業維修。同時,加強預防措施和日常維護也是減少設備故障的有效手段。一、初步檢查與確認觀察故障現象:仔細觀察并記錄故障現象,如無法啟動、溫度異常、雜交效率低等。檢查電源:確認電源插座是否正常供電,電源線是否插緊。檢查電源開關是否處于開啟狀態。二、核酸分子雜交箱的具體故障分析與排查溫控系統故障:現象:環境溫度超出預設范圍。分析:可能是溫控系統...

  • 2024

    11-1

    電穿孔儀工作時,會在含有細胞的介質中施加一個短時的、高強度的電場。這個電場通常由電極產生,電極間的距離和電場強度都是可以調節的參數。在電場作用下,細胞膜上的磷脂分子頭部朝向電場的負極,而疏水的尾部則朝向正極,這種重新排列導致膜的穩定性下降,從而形成孔洞。這些孔洞是動態的,它們在電場作用后不久就會自行封閉。孔洞的存在時間通常很短,從幾毫秒到幾秒不等,具體時間取決于電場的強度、持續時間以及細胞類型。電穿孔儀有多種類型,包括批量電穿孔和單細胞電穿孔,開放式電穿孔器和封閉式電穿孔器,...

  • 2024

    10-26

    分子雜交儀(molecularhybridizationinstrument)是用于分子生物學研究的儀器,主要用于DNA或RNA的雜交實驗。它的工作原理可以簡要概括如下:1.樣品制備:需要準備待測的DNA或RNA樣品。樣品可以是提取自細胞或組織的總RNA或總DNA,也可以是經過特定處理的特定片段的DNA或RNA。2.探針標記:接下來,需要準備一種能夠與待測樣品中目標序列互補配對的DNA或RNA探針。通常,這些探針會經過標記,例如使用熒光染料或放射性同位素進行標記,以便后續檢測...

  • 2024

    10-18

    基因導入儀基于不同的物理或化學原理,實現外源基因向細胞內的轉移。常見的物理方法包括電穿孔法、顯微注射法、激光微照射等,這些方法通過施加外力(如電場、機械壓力或激光)來破壞細胞膜的完整性,使外源基因能夠進入細胞內部。化學方法則主要利用某些化學物質(如脂質體、聚乙二醇等)與DNA結合,形成復合物后通過細胞膜的內吞作用進入細胞。基因導入儀的類型:電穿孔:利用短暫的高壓電場在細胞膜上形成微小孔洞,允許DNA分子通過。這種方法操作簡便,效率高,適用于多種細胞類型。顯微注射:通過顯微操作...

  • 2024

    10-12

    細胞電轉化儀利用電穿孔技術,將外源性DNA或其他分子物質導入到細胞或細菌細胞內。其原理是在高壓電場的作用下,細胞膜會發生短暫的孔洞(電穿孔現象),從而使外源性DNA能夠穿透細胞壁和細胞膜,進入細胞內部,甚至到達細胞核,實現基因的轉移或表達。細胞電轉化儀的工作步驟:將細胞與外源基因物質混合在適當的緩沖液中。通過電極對混合液施加電場,使細胞膜上形成孔隙。外源基因物質在電場的作用下進入細胞,并被輸送到細胞核內(對于細胞核電轉化儀而言)。轉染后的細胞在適宜的條件下進行培養,使導入的基...

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